改良油红〇染色试剂盒(环保型)
货号：R02460
规格：4×50mL
保存： 室温，避光保存，有效期为1年。
产品组成：
名称 | 4×50mL | 保存 |
试剂(A):油红O染色缓冲液 | 50mL | 室温 |
试剂(B):油红O染色液 | 50mL | 室温，避光 |
试剂(C):油红O染色分化液 | 50mL | 室温 |
试剂(D):Mayer苏木素染色液 | 50mL | 室温，避光 |
产品介绍：
脂质(Lipid)是中性脂肪、类脂及其衍生物的总称，其共同的物理特性是不溶于水，易溶于有机溶剂(如 乙醇、丙酮等)。组织内脂质经常采用苏丹Ⅱ、苏丹Ⅲ、苏丹IV、苏丹黑B、 油红〇法等进行染色。传统方法采用苏丹染料，最近发现偶氮染料油红〇更适合脂肪的染色。油红〇是很强的染脂剂，较易与中性脂肪结合，与磷脂结合力稍差，其染色原理一般认为是相似相溶作用或物理吸附作用使脂肪染色。染料在细 胞内脂质的溶解度较原溶剂中的溶解度更大，所以在染色时染料就从有机溶剂转移入脂质而使脂肪染色。
改良油红O 染色试剂盒(环保型)使用无味低挥发的环保溶剂替代具有一定危险性的经典溶剂，在不影响脂质定位和大小的情况下大幅降低使用风险和操作难度，对实验操作人员十分友好。脂肪阳性染色结果呈橘红至红色，具体颜色因脂质种类和浓度而定。
操作步骤： (仅供参考)
1. 取材后使用2-8℃冰箱预冷的中性福尔马林固定液或4%组织细胞固定液充分固定后切片或液氮速冻取材制备新鲜冰冻切片，通常建议10-12um。
2. 切片放置复温，滴加试剂(A):油红〇染色缓冲液覆盖切片处理2-5min。 (见注意事项1)
3. 倾去多余缓冲液无需清洗，直接滴加预热好的试剂(B):油红O 染色液覆盖切片后室温染色15min
4. 倾去多余染色液，滴加等量试剂(C):油红〇染色分化液分化处理2-5min至切片颜色均匀。
5. 蒸馏水浸洗1min充分去除分化液，滴加试剂(D):Mayer苏木素染色液染色2min。
6. 蒸馏水洗1min后自来水反蓝5-10min至细胞核呈清晰蓝色。
7. 使用预热融化的甘油明胶封片剂封片后光学显微镜观察。
染色结果：
中性脂肪 橙红色或橘红色
磷脂 粉红色
细胞核 蓝色
注意事项：
1. 脂质易溶于有机溶剂， 一般使用冰冻切片进行染色，推荐使用预冷的中性福尔马林固定液或 4%组织细胞固定液进行组织固定后制备切片，同时不建议对速冻组织切片使用丙酮进行二次固定
2. 试剂(A):油红O 染色缓冲液具备固定和缓冲作用，用于速冻切片可适当延长孵育时间(5 min) 对组织进行适当固定。如组织为固定后切片可适当缩短孵育时间(2 min)。
3. 染色液和缓冲液较粘稠，推荐吸头剪口后吸取，或冬季使用前适当预热(25-28 ℃)。
同时因为较粘稠，无法完全倾倒干净属正常现象，直接遵循操作步骤进行下一步即可。
- 染色结果不能长期保存，应尽快观察及照相。
- 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。