改良油红O染色液
货号:R02470
规格:2×50mL/2×100mL
保存:2-8℃,避光保存,有效期为6个月。
试剂盒内容:
产品名称 | 2×50ml | 2×100ml | 2×500ml | Storage | |
试剂(A): 改良Oil red O stain | A1:Oil red O stain A | 30ml | 60ml | 300ml | 2-8℃避光 |
A2:Oil red O stain B | 20ml | 40ml | 200ml | RT | |
临用前,按A1:A2=3:2比例混合,静置10min,即获得改良Oil red O Stain,不宜提前配制 | |||||
试剂(B):Mayer苏木素染色液 | 50ml | 100ml | 500ml | 2-8℃避光 | |
产品简介:
脂质(Lipid)是中性脂肪、类脂及其衍生物的总称,其共同的物理特性是不溶于水,易溶于有机溶剂(例如乙醇、乙醚等)。人体的脂肪主要有两种:1、储存脂肪,如中性脂肪,主要分布于皮下、肾、胰腺等部位。2、结构脂肪,如类脂(磷脂、糖脂、胆固醇等),主要分布于细胞内。中性脂肪(Neutral fat)是由三分子脂肪酸和一分子甘油组成的脂类,呈中性。中性脂肪是储存能量的方式之一,在氧化时释放出能量。
中性脂肪染色经常采用苏丹Ⅱ、苏丹Ⅲ、苏丹Ⅳ、苏丹黑B、油红O法等。传统方法中,常采用苏丹染料,最近发现偶氮染料油红O更适合脂肪的染色。油红O是很强的脂溶剂和染脂剂,较易与甘油三脂结合呈小脂滴状),与磷脂结合力稍差。其染色原理一般认为是物理上的溶液作用或吸附作用,借溶液作用使脂肪染色。染料在冰冻切片内脂质的溶解度较在原溶剂中的溶解度更大,所以在染色时染料就从有机溶剂转移入脂质而使脂肪染色。
改良油红O染色液主要用于显示组织器官的脂肪变性和类脂质的异常沉着,常发生于肝、肾、心等实质脏器的脂肪变性,细胞内出现多数中性脂肪滴;鉴别和诊断脂肪组织中所发生的肿瘤及其性质。标本不采用含有乙醇的固定液(如需要固定可采用10%的福尔马林)、也不采用石蜡切片,需用冰冻切片或碳蜡切片。脂肪的阳性染色结果呈橘黄至红色,但具体颜色因脂质浓度而定。
自备材料:60%的异丙醇、蒸馏水、1%的盐酸乙醇溶液、稀碳酸锂溶液、甘油明胶或阿拉伯糖胶
操作步骤(仅供参考):
- 冰冻切片厚度6~10μm,不固定或10%福尔马林固定10min后水洗。
- 切片入蒸馏水中稍冲洗。
- 切片入60%的异丙醇内浸洗20~30s。
- 切片入改良油红O染色液中(加盖),密闭染色10~15min。
- 分色:入60%的异丙醇内稍洗以便去除染液。
- 入蒸馏水中稍微清洗。
- Mayer苏木素染色液复染核1~2min。
- (可选)1%的盐酸乙醇溶液稍微分化一下。
- (可选)自来水漂洗10min或稀碳酸锂溶液中促蓝。
- 入蒸馏水中稍微清洗。
- 用滤纸吸干周围水分。
- 甘油明胶或阿拉伯糖胶封固。
染色结果:
中性脂肪 | 橙红色或橘红色 |
细胞核 | 蓝色 |
注意事项:
- 改良油红O染色液不够稳定,易产生沉淀,不宜提前配制。
- 如果60%的异丙醇不易获得,亦可采用70%的乙醇。
- 由于脂肪易溶于有机溶剂,所以显示脂肪一般不能像石蜡切片一样处理,而通过冰冻切片染色来显示。
- 作脂肪染色的冰冻切片不可太薄,过薄的切片常会使脂质丢失。
- Mayer苏木素染色液复染时间不能过长。
- 染色结果不能长期保存,应尽快观察及照相。
- 甘油明胶封固的样本,保存时间不长。如需长期保存,可以在盖玻片与载玻片交界的边缘用中性树胶封闭。
- 产品信息仅供参考。本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗,食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。为了您的安全和健康,请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。