产品详情
钙盐染色试剂盒(Von Kossa法)
货号:R02480
规格:2×50mL
保存:2-8℃,避光保存,有效期6个月。
产品内容:
名称 | 规格 | 保存 |
试剂(A): Von Kossa银溶液 | 50mL | 2-8℃,避光 |
试剂(B): 海波溶液 | 50mL | RT |
试剂(C): Von Kossa对照液 | 10mL | 2-8℃ |
产品简介:
钙在人体内大量存在,构成骨骼作为支持人体的支架,在分泌、运送、肌肉收缩、神经传导等也起重要作用。许多染料可以于钙形成螯合物,包括茜素红S、红紫素、核固红等。茜素红S属一种蒽醌类衍生物,是茜素磺酸钠盐,它能与碳酸钙或磷酸钙中的钙盐螯合形成橙红色复合物。
钙盐染色常用方法有Von Kossa溶液和茜素红S法,本产品原理在于该法是一种金属置换法,Von Kossa银溶液作用于含有不溶性钙盐的切片时,钙被银所置换,银盐在光的作用下被还原为黑色金属银,适用于大量样本的钙盐组织染色。
操作步骤(仅供参考):
1、 组织固定于10%中性福尔马林,常规脱水包埋。
2、 切片厚度5μm,常规脱蜡至水。
4、 切片入Von Kossa银溶液强光照射15-60min。蒸馏水洗1min。
6、 (可选)滴加海波溶液处理2min,蒸馏水洗2min。
7、 (可选)HE染色液或Van Gieson复染。
8、 常规脱水透明,中性树胶封固。
阴性对照(可选):取另外一张连续切片脱蜡至水,置于Von Kossa对照液处理20min,流水冲洗5min与实验片一同入Von Kossa银溶液,其余步骤同上。
染色结果:
钙盐 | 红褐色至深黑色 |
细胞核 | 根据复染液不同而不同 |
背景 | 根据复染液不同而不同 |
注意事项:
- 钙盐组织固定以中性福尔马林为佳。不宜采用Bouin液等酸性固定液和甲醛钙固定液。如用常规的10%福尔马林固定,固定4~6h后即可进行脱水包埋,以防止固定液酸化导致钙盐溶解。
- 作用时间取决于阳光照射时光的强度和时间。
- 若暴露于紫外灯下,则应缩短照射时间,一般5-10min即可。
- 海波溶液处理步骤作用为去除非特异着色,Von Kossa银溶液染色后镜下观察无明显非特异着色可选择不用海波溶液处理。
- 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。