产品详情
基底膜六胺银染色液(PASM)
货号:R02710
规格:6×50mL
保存:2-8℃避光保存,有效期6个月。
试剂盒组成:
名称 | 6×50mL | 保存 | |
试剂(A):过碘酸溶液 | 50mL | 2-8℃,避光 | |
试剂(B):铁明矾溶液 | 50mL | RT | |
试剂(C): 六胺银工作液 | C1:银溶液 | 1.5mL | 2-8℃,避光 |
C2:六胺溶液 | 25mL | 2-8℃,避光 | |
C3:硼砂溶液 | 25mL | RT | |
C1,C2,C3,按操作说明混合配制 | |||
试剂(D):氯化金溶液 | 50mL | 2-8℃,避光 | |
试剂(E):海波溶液 | 50mL | RT | |
试剂(F):淡绿溶液 | 50mL | RT | |
产品说明:
该试剂仅用于科研领域,不适用于临床诊断或其他用途。
基底膜六胺银染色又叫PASM染色(Periodic Acid-Silver Methenamine),其是一种经典显示基底膜的方法。组织经过氧化,使基底膜内的黏多糖暴露出醛基,醛基把六胺银还原为黑色的金属银。氯化金可使金属银转变为更稳定的金属金,同时使背景更清晰,海波可以固定并洗去未还原的银离子。
六胺银染色能清晰地显示基底膜,在肾病变中应用最多,常用来观察肾小球毛细血管基底膜在炎性损伤时如断裂、增生、折叠等形态改变。
操作步骤(仅供参考):
- 石蜡切片常规切片脱蜡复水。
- 切片入过碘酸溶液氧化15min。蒸馏水洗2min。
- 入铁明矾溶液染色10min。蒸馏水洗2min。
- 配制六胺银贮备液:银溶液:六胺溶液=6:100混合,会有少量沉淀产生,充分溶解即可;可2-8℃保存,3个月有效。
- 配制六胺银工作液:六胺银贮备液:硼砂溶液=106:100混合,六胺银工作液是一次性的,不能久放。配置后可放入60℃温箱中预热30min,再放入切片进行染色。
- 切片充分清洗后倾去多于水分,滴加或浸入预热好的六胺银工作液中,60℃水浴或恒温染色20~30min,切片呈烟草黄色或黑色为止。入蒸馏水中清洗1min。
- 用氯化金溶液调色1~2min(以镜下观察为主)。蒸馏水洗2min。
- 置于海波溶液处理1 min。蒸馏水洗1min。
- 用淡绿溶液复染1 min。蒸馏水洗1min。
- 95%乙醇开始脱水,二甲苯透明,中性树胶封封固。
染色结果:
肾小球囊基底膜、肾毛细血管球基底膜 | 红褐色到黑色 |
背景 | 绿色 |
注意事项:
- 实验中所用玻璃器皿,应预先放入洗液(如无洗液,可用0.1M盐酸浸泡,清洗干净)浸泡过并冲洗干净,烤干。
- 六胺银储备液可2-8℃保存,3个月有效。
- 配制好的六胺银工作液是一次性的,不能久放,建议在6h内使用完毕。
- 氯化金调色时一定要在显微镜下观察,实时查看其颜色变化。
- 淡绿溶液为衬染试剂,可根据观察需要自行更换为其他衬染试剂(如伊红染色液等)。
- 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。