DAB染色样本保存液说明书
货号: R02980
规格：100mL
保存：RT，1年
产品说明（仅供参考）:
该试剂仅用于科研领域，不适用于临床诊断或其他用途。
植物组织在胁迫环境条件下会产生多种活性氧 (ROS)，ROS活性非常大且极其不稳定，因此 ROS 的检测通常因其最终产物而定。过氧化氢是活性氧的一种。在过氧化氢酶的催化下，过氧化氢能与 DAB (3,3-二氨基联苯胺四盐酸盐) 速反应生成棕红色化合物从而定位组织中的过氧化氢。植物过氧化氢染色液根据上述基本原理也称为 DAB 染色法用于植物活组织中的过氧化氢染色。
DAB 染色样本保存液可用于植物样品过氧化氢定位染色后的保存，样本置于该保存液中常温保存一周。一般应用于较嫩的根尖、叶片等的整体染色，染色后有过氧化氢聚集的部位呈棕色至深棕色。
自备材料:
1、新鲜的植物叶片或根、自来水、蒸馏水、95%乙醇
2、超声波、磁力搅拌器、电子天平、滤纸、照相机
3、DAB 染色液(1mg/mL，pH3.8)
操作步骤(仅供参考):
1、样本准备: 采集经胁迫(例如重金属)的植物幼苗或根尖，自来水稍洗净，置于滤纸上吸干多余的水分。
2、染色: 将植物幼苗或根尖浸没在 DAB 染色液中，常温避光染色 2~6 h，至阳性部位出现深棕色，其余部位近无色或者呈植物本身的颜色即可。(根据植物幼嫩程度和显色程度调整染色时间)
3、脱色: 用摄子将植株幼苗或者叶片小心取出，浸入蒸馏水中来回漂洗 3~5 次，置于滤纸上吸干多余水分后，浸入 95%乙中 40℃处理3~16 h，目的是脱去植株幼苗或者叶片本身的叶绿素，脱色期间可多次更换新鲜的 95%乙醇
4、观察: 用子取出植株幼苗或者叶片，浸入蒸馏水中来回漂洗 3~5 次，置于滤纸上吸干多余水分后，将样本转入适量 DAB 样本保存液中浸泡 30 min，随后可取出拍照。样本可置于该保存液中常温保存一周。
注意事项:
1、DAB 染色工作液配制好以后需 4℃避光保存，一周内使用。存放时间过久，会影响显色
2、因过氧化氢容易分解，且任何外在因素都可能刺激植物应激产生过氧化氢，因此植物样本需要新鲜采集，并尽快完成染色。建议做阴性及阳性空白对照组。
3、样本染色完成后尽快拍照保存结果。
4、DAB 可能具致癌性，请小心操作，避免直接接触。
5、染色和脱色步骤也可参考如下建议操作: 组织放入染液中，抽真空，-0.1MPa 保持负压20~30min，再于室温下静置染色 60min，弃染色液; 加入 95%乙醇，于70~80°C水浴锅脱色，每隔 10min 换一次 95%乙醇，待样品绿色全部褪去后可停止脱色。
6、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。