硫堇染色液 (0.4% )

硫堇染色液

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产品简介：

染色体是细胞内具有遗传性质的遗传物质深度压缩形成的聚合体，易被碱性染料染成深色，所以叫染色体(染色质)，染色体和染色质是同一物质在细胞分裂间期和分裂期的不同形态表现而已。染色体出现于分裂期，染色质出现于间期，呈丝状，其本质都是脱氧核糖核酸(DNA)和蛋白质的组合(即核蛋白组成的)，不均匀地分布于细胞核中，是遗传信息(基因)的主要载体，但不是唯一载体(如细胞质内的线粒体)。

许多染料对DNA都有不同程度的亲和性，故可以作为染色体的染色。在染色体的常规染色中，一般用姬姆萨、地衣红、福尔根、石炭酸复红等可获得较好的染色效果。

硫堇染色液可用于口腔黏膜、尿液、羊水、绒毛细胞以及人工培养细胞等样本的染色体染色，尤其适用于较难上色的性染色质的染色。硫堇染色亦可用于肥大细胞的染色，异染性物质呈紫红色，其他呈蓝色。

自备材料：

PBS或生理盐水、蒸馏水、载玻片、盖玻片、固定液(甲醇:冰乙酸=3:1)、1mol/L HCl、显微镜

操作步骤(仅供参考)：

(一)样本处理

1、口腔黏膜细胞：

1. 用PBS或生理盐水漱洗口腔数次，尽量去除口腔内细菌和其他杂物。
2. 操作人员一手拉住患者的下唇，一手用压舌板或牙签钝头端刮取两侧颊部或下唇内侧的粘液，丢弃第一次刮取的细胞。
3. 同一部位连续刮取数次，将刮取物涮入装有5ml生理盐水的离心管中。
4. 1500g离心10-15min，弃上清液，留取细胞团。
5. 加入新鲜固定液(甲醇:冰乙酸=3:1)10ml，轻轻混匀制成悬液，室温放置30min。
6. 取一滴悬液至预冷的干净载玻片上，晾干。

2、尿液中脱落细胞：

1. 取患者干净的中段尿液，混匀，吸取10ml至离心管中。
2. 1500-2000g离心10-15min，弃上清液，留取细胞团。
3. 加入新鲜固定液(甲醇:冰乙酸=3:1)10ml，轻轻混匀制成悬液，室温放置30min。
4. 1500g离心10-15min，弃上清液，留取细胞团。
5. 根据细胞的多少，加入数滴新配制的固定液，充分混匀制成悬液。
6. 取一滴悬液至预冷的干净载玻片上，晾干。

3、羊水细胞：

1. 按妇科常规经腹壁穿刺妊娠16周左右孕妇的羊水10ml至离心管中，抽取羊水时先抽取2-3ml丢弃，以免母体细胞的污染。
2. 1500g离心10min，弃上清液，留取细胞团。
3. 加入新鲜固定液(甲醇:冰乙酸=3:1)10ml，轻轻混匀制成悬液，室温放置30min。
4. 1500g离心15min，弃上清液，留取细胞团。
5. 根据细胞的多少，加入数滴新配制的固定液，充分混匀制成悬液。
6. 取一滴悬液至预冷的干净载玻片上，晾干。

(二)染色质染色

1. 玻片标本置于1mol/L HCl中，37℃孵育20min。
2. 蒸馏水充分冲洗，自然干燥。
3. 将玻片样本浸入硫堇染色液，染色15-20min。
4. 蒸馏水冲洗，自然干燥。
5. 在低倍镜下查找均匀分散的细胞群，转油镜认真观察。

染色结果：

异染性物质呈紫红色，其他呈蓝色。

注意事项：

1. 在为了获得细胞沉淀的离心的过程中，对于特殊细胞，如果细胞沉淀不充分，可以适当提高离心力或延长离心时间。
2. 如2%染液浓度较高，可用蒸馏水稀释至1%或0.4%使用。
3. 产品信息仅供参考。本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗，食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。为了您的安全和健康，请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。