六胺银染色液 (改良Grocott-苏木素法 )

六胺银染色液(改良Grocott-苏木素法)

货号：R03760

规格：6×50ml

保存：4℃，避光，6个月。

产品内容：

产品说明：

六胺银染色液是一种经典显示基底膜的方法。经过Grocott 改良之后组织经铬酸氧化，使真菌内的黏多糖暴露出醛基，醛基把六胺银还原为黑色的金属银。氯化金可使金属银转变为更稳定的金属金，同时使背景更清晰，海波可以固定并洗去未还原的银离子。

本法采用苏木素复染(也可根据需要自行添加伊红对染)，对卡氏肺囊虫、曲霉和白色念珠菌的显示效果很好，可看到囊虫或真菌与周围组织的关系。

自备材料：

1、蒸馏水、系列乙醇、封片剂

2、水浴锅或恒温箱

操作步骤（仅供参考）：

1. 组织固定于甲醛固定液中，常规脱水包埋，切片4~5μm，脱蜡至水洗。
2. 切片入氧化剂氧化20min，流水稍洗。
3. 入漂白剂处理1min，以除去氧化剂。
4. 流水冲洗5min，蒸馏水浸洗2 次，每次30~60s。
5. 切片放入配制好的预热至60℃六胺银工作液中，加盖60℃恒温染色20～60min，切片呈淡黄色即可取出，经水洗后显微镜观察是否有菌体出现。如有淡棕色菌体出现，应每隔5~10min 观察1 次以控制菌体着色深浅，直至显色理想。
6. 入蒸馏水中清洗。
7. 用氯化金溶液调色1～2min，蒸馏水洗20~40s。
8. 置于海波溶液2 min，流水冲洗5min。
9. 滴加苏木素复染液染色5~10min，流水冲洗5~10min。
10. 常规脱水，二甲苯透明，中性树胶封固。

染色结果：

真菌、上皮粘液、卡氏肺囊虫包囊壁 黑色或棕黑色

注意事项：

1. 实验中所用玻璃器皿，应预先用硫酸洗液浸泡并用蒸馏水冲洗干净、烤干。
2. 六胺银工作液配制后应先放入温箱中预热，温度要达到60℃时，再放人切片进行染色；如用水浴锅代替恒温箱，需将温度设定在48~50℃，否则切片会很快变黑而难以掌握，一般建议在恒温箱中孵育染色。
3. 配制好的六胺银工作液是一次性的，不宜久置。
4. 氯化金调色时一定要在显微镜下观察。
5. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。