苏木素伊红(HE)染色液(醇溶)
货号:R04890
产品组成:
名称 | 2×100mL | 2×500mL | Storage |
试剂(A): 苏木素染色液 | 100mL | 500mL | RT |
试剂(B): 伊红染色液(醇溶) | 100mL | 500mL | RT |
保存:RT,有效期12个月。
产品说明:
苏木精-伊红染色法( Hematoxylin-Eosin staining ),简称HE 染色法,是病理学常规制片中最基本的染色方法。苏木精染液为碱性,主要使细胞核内的染色质与胞质内的核糖体着紫蓝色;伊红为酸性染料,主要使细胞质和细胞外基质中的成分着红色。
染色过程需要优化,着色情况与组织或细胞的种类有关,也随其生活周期及病理变化而改变。例如,很多细胞在新生时期胞浆对伊红着色较淡或轻度嗜碱,当其衰老时或发生退行性变则呈现嗜伊红浓染。胶原纤维在老化和出现透明变性时,伊红着色由浅变深。
本产品所包含试剂均为工作液,可直接使用。
自备材料:
1、自来水或蒸馏水、二甲苯或浸蜡脱蜡透明液、盐酸乙醇分化液、系列乙醇、中性树胶
2、蓝化液(稀氨水、碳酸锂溶液等)、乙醚-乙醇混合固定液、4%多聚甲醛
操作步骤(仅供参考):
(一)石蜡切片染色。
1.切片脱蜡至水。
①二甲苯或浸蜡脱蜡透明液作用 2 次,每次5~10min。
②(可选)无水乙醇作用 2 次,每次 3~5min。
③95%乙醇 3~5min
④90%乙醇 3~5min
⑤80%乙醇 3~5min
⑥自来水或蒸馏水(亦可用 30~40℃温水)冲洗 1~3min
2.染色
①苏木素染色液染色 3~8min
②自来水或蒸馏水冲洗 5~10s
③(可选)盐酸乙醇分化 2~5s
④自来水冲洗 20~30s
⑤蓝化液或温水返蓝 20~40s
⑥80%乙醇脱水 30~60s
⑦伊红染色液(醇溶)染色 20~120s
3.脱水、透明、封固
①80%乙醇 10~20s
②90%乙醇 10~20s
③95%乙醇作用 2 次,每次 1~2min。
④无水乙醇作用 2 次,每次 2~3min。
⑤二甲苯或浸蜡脱蜡透明液透明 3 次,每次2~3min。
⑥中性树胶封片。
(二)冰冻切片
1、乙醚-乙醇混合固定液 5~10s
2、自来水冲洗 2~5s
3、苏木素染色液滴染 1~2min(可加热至 50℃)。
4、自来水冲洗 2~5s
5、(可选)盐酸乙醇分化 2~5s
6、自来水冲洗 2~5s
7、蓝化液或温水返蓝 2~5s
8、80%乙醇脱水 5~10s
9、伊红染色液(醇溶)染色 2~5s
10、80%乙醇 1~2s
11、95%乙醇 1~2s
12、无水乙醇 2~5s
13、苯酚二甲苯(1:3) 2~5s
14、二甲苯或浸蜡脱蜡透明液透明 3 次,每次2~5s。
15、中性树胶封片。
(三)细胞染色
1、4%多聚甲醛固定 10~20min。
2、自来水冲洗 2 次,每次 2min。
3、蒸馏水冲洗 2 次,每次 2min。
4、染色、脱蜡、透明、封固步骤同石蜡切片的染色步骤,作用时间应相应缩短。
染色结果:
细胞核呈蓝色;
细胞质、肌纤维、胶原纤维、甲状腺胶质等呈深浅不一的红色;
角蛋白、红细胞等呈明亮的橙红色。
注意事项:
1、切片脱蜡应尽量干净;温度低时,可在恒温箱 60~70℃处理。
2、系列乙醇应经常更换新液。
3、盐酸乙醇分化时间应根据切片厚薄、组织类别以及新旧而定,另外分化后自来水冲洗时间应该足够,以便彻底清洗酸。
4、乙醚-乙醇混合固定液是由乙醚和 95%乙醇等量混合而得,再加入适量乙酸,密闭保存。
5、冷冻切片染色时间尽量要短。