酸性α-乙酸萘酚酯酶染色试剂盒(ANAE法)说明书
货号: R04920
规格:3×10ml
英文名称:Acid α-Naphthol Acetate Esterase Stain Kit(ANAE Method)
保存:2-8℃,避光,6个月
产品说明(仅供参考):
本产品仅用于科研,不可用于其他。
酯酶主要分为非特异性酯酶(non-specific esterase)、酯酶(lipase)、胆碱酯酶(choli-esterase)。酸性α-乙酸萘酚酯酶染色液(ANAE法)又称非特异性酯酶染色液,其原理是酸性条件下细胞中的酸性酯酶将α-乙酸萘酚水解产生α-萘酚,α-萘酚再与六偶氮副品红偶联,生成不溶性红色沉淀,定位于细胞质。
本染色试剂盒对酯酶染色无特异性,可用于血液、骨髓或细胞涂片、冰冻切片的非特异性酯酶染色,亦可用于氟化钠抑制试验。
试剂盒组成
名称 | 3×10mL | 保存 | |
试剂(A):ANAE固定液 | 10ml | 室温,避光 | |
试剂(B):ANAE孵化液 | B1:新品红溶液 | 0.05ml | 2-8℃,避光 |
B2:Nitrite溶液 | 0.05ml | 2-8℃,避光 | |
B3:α-NAE溶液 | 0.5ml | 2-8℃,避光 | |
B4:ANAE缓冲液 | 9.5ml | 2-8℃ | |
临用前,按B1:B2:B3:B4=1:1:10:190充分混合,即为ANAE孵化液,即配即用。 注意应先B1:B2=1:1混匀后,再与B3、B4混匀 | |||
试剂(C):甲基绿染色液 | 10ml | 室温,避光 | |
试剂(D):ANAE抑制剂 | 0.2ml | 室温,避光 | |
自备材料:
载玻片、湿盒、显微镜
使用说明(仅供参考)
- 血液、骨髓或细胞图片、冰冻切片入ANAE固定液固定10-15min
- 水洗5min
- 入配制好的ANAE孵育液,放入湿盒中,室温避光孵育1h,水洗
- 入甲基绿染色液复染5-15min,水洗,镜检
染色结果:
细胞质 暗红色/棕色
细胞核 绿色
氟化钠抑制实验:
按ANAE抑制剂:ANAE孵育液=1:25的比例,在ANAE孵育液中加入ANAE抑制剂,其余按上述染色法进行。
注意事项:
- 血液或骨髓细胞涂片应新鲜,厚薄适宜,一般2天内染色,否则会影响酶的活性
- ANAE孵育液易失效或降低阳性程度,即配即用,不宜久置。
- ANAE孵育液配置后易出现浑浊,但不会影响染色效果。
- 单核细胞为中度阳性至强阳性。对ANAE抑制剂敏感。正常粒细胞呈阴性反应。
- 每次染色时,应有阳性对照。
6、为了您的安全和健康,请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。