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酸性α-乙酸萘酚酯酶染色液 (ANAE法 )

货    号 R04920
产品分类 染色剂及相关
规格与价格
同货号共 2 个规格,已合并到当前页面展示
规格 单位 价格(元) 操作
10mL*3 ¥1060 询价
20mL*3 ¥972 询价
产品详情

酸性α-乙酸萘酚酯酶染色试剂盒(ANAE法)说明书

货号: R04920

规格:3×10ml

英文名称:Acid α-Naphthol Acetate Esterase Stain Kit(ANAE Method)

保存:2-8℃,避光,6个月

产品说明(仅供参考):

本产品仅用于科研,不可用于其他。

酯酶主要分为非特异性酯酶(non-specific esterase)、酯酶(lipase)、胆碱酯酶(choli-esterase)。酸性α-乙酸萘酚酯酶染色液(ANAE法)又称非特异性酯酶染色液,其原理是酸性条件下细胞中的酸性酯酶将α-乙酸萘酚水解产生α-萘酚,α-萘酚再与六偶氮副品红偶联,生成不溶性红色沉淀,定位于细胞质。

本染色试剂盒对酯酶染色无特异性,可用于血液、骨髓或细胞涂片、冰冻切片的非特异性酯酶染色,亦可用于氟化钠抑制试验。

试剂盒组成 

名称

3×10mL

保存

试剂(A):ANAE固定液

10ml

室温,避光

试剂(B):ANAE孵化液

B1:新品红溶液

0.05ml

2-8℃,避光

B2:Nitrite溶液

0.05ml

2-8℃,避光

B3:α-NAE溶液

0.5ml

2-8℃,避光

B4:ANAE缓冲液

9.5ml

2-8℃

临用前,按B1:B2:B3:B4=1:1:10:190充分混合,即为ANAE孵化液,即配即用。

注意应先B1:B2=1:1混匀后,再与B3、B4混匀

试剂(C):甲基绿染色液

10ml

室温,避光

试剂(D):ANAE抑制剂

0.2ml

室温,避光

自备材料:

载玻片、湿盒、显微镜

使用说明(仅供参考)

  1. 血液、骨髓或细胞图片、冰冻切片入ANAE固定液固定10-15min
  2. 水洗5min
  3. 入配制好的ANAE孵育液,放入湿盒中,室温避光孵育1h,水洗
  4. 入甲基绿染色液复染5-15min,水洗,镜检

染色结果:

细胞质 暗红色/棕色

细胞核 绿色

氟化钠抑制实验:

按ANAE抑制剂:ANAE孵育液=1:25的比例,在ANAE孵育液中加入ANAE抑制剂,其余按上述染色法进行。

注意事项:

  1. 血液或骨髓细胞涂片应新鲜,厚薄适宜,一般2天内染色,否则会影响酶的活性
  2. ANAE孵育液易失效或降低阳性程度,即配即用,不宜久置。
  3. ANAE孵育液配置后易出现浑浊,但不会影响染色效果。
  4. 单核细胞为中度阳性至强阳性。对ANAE抑制剂敏感。正常粒细胞呈阴性反应。
  5. 每次染色时,应有阳性对照。

6、为了您的安全和健康,请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。