酸性磷酸酶染色液 (偶氮偶联法 )

酸性磷酸酶染色液（偶氮偶联法）

货号：R04960

规格：4x2mL/4x 10mL/4x20mL

保存：-20°C,避光保存，有效期6个月。

产品组成：

产品介绍：

酸性磷酸酶（acid phosphatase, ACP）分布极广泛，遍布各种组织，主要存在于细胞的溶酶体内，所以 常作为溶酶体标志酶。酸性磷酸酶染色液（偶氮偶联法）以荼酚AS-BI为底物，在酸性pH下被酸性磷酸酶 水解释放出磷酸和萘酚，荼酚与重氮盐偶联生成有色产物，定位于细胞质中。多用于新鲜血涂片、细胞涂片、冰冻切片等，亦可用于石蜡切片。

操作步骤：（仅供参考）

（一） 血液、细胞涂片：

1. 推片：取新鲜血液或骨髓涂片置于载坡片上，推玻片于载玻片保持30度，置于血液或细胞滴液的正前方，稍往后移与血液或细胞滴液接触使后者沿推片下缘散开，再匀速沿载玻片平面平稳向前滑动至铺满血膜为止。
2. 自然晾干，ACP固定液4'C固定30s-3min,多数情况下30-60s即可。
3. 水洗，稍微晾干（不易过分干燥）。
4. 切片入ACP孵育液，置于37°C温箱，避光浸染45-60min,水洗。
5. 复染：苏木素染色液染色5min或甲基绿染色液染色2-3min。
6. 水洗、晾干、镜检。

（二） 冰冻切片：

1. 冰冻切片回温至37°C,水中浸泡l-2min
2. 自然晾干，ACP固定液4°C固定l-3min
3. 水洗，稍微晾干（不易过分干燥）。
4. 切片入ACP孵育液，置于37°C温箱，避光浸染45-60min,水洗。
5. 复染：苏木素染色液染色5-8min或甲基绿染色液染色2-3min。
6. 水洗、晾干、镜检。

（三） 石蜡切片：

1. 石蜡切片脱蜡5-10min,重复一次。
2. 无水乙醇5min, 90%乙醇和70%乙醇各2min。水洗2min。
3. 自然晾干，ACP固定液4°C固定30s-3min,多数情况下30-60s即可。
4. 水洗，稍微晾干（不易过分干燥）。
5. 切片入ACP孵育液，置于37°C温箱，浸染45-60min,水洗。
6. 复染：苏木素染色液染色5-8min或甲基绿染色液染色2-3min。
7. 水洗、晾干、镜检。

染色结果

临床意义：

1. 毛细胞白血病的毛细胞ACP染色呈强阳性或中度阳性，且不被酒石酸抑制。
2. 急性口血病幼单核细胞ACP染色呈阳性，原淋巴细胞呈弱阳性，原粒细胞对ACP反应不一。
3. T淋巴细胞ACP染色呈阳性，颗粒粗大、分布密集。B淋巴细胞呈阴性或颗粒细小的弱阳性。
4. 戈谢细胞呈强阳性，尼曼-皮克细胞呈阴性或弱阳性。

注意事项：

1. ACP孵育液易失效，本法直用皮肤穿刺血涂片，晾干后应及时染色
2. 对冰冻切片染色时，应减少切片在室温暴露的时间。
3. 样本需新鲜，取材后应立即处理，否则会影响酶的活性。
4. 组织固定需在4°C冰箱进行，时间不宜超过24h,否则酶活性会减弱或消失。
5. 组织在石蜡包埋时，温度不宜高于56°C应使用熔点为52-54度的石蜡进行浸蜡，浸蜡时间要短，否则酶活性会减弱或消失。