糖原 D-PAS 染色液(淀粉酶消化法)
货号: R05070
规格: 5×50mL/5×100mL
有效期：2-8℃保存，避免光照，复检期为 6 个月。
产品内容：
编号 名称 | 5×50ml | 5×100ml | Storage |
试剂（A）淀粉酶溶液 | 50ml | 100ml | 4℃ |
试剂（B）氧化剂 | 50ml | 100ml | 4℃ 避光 |
试剂（C）Schiff Reagent | 50ml | 100ml | 4℃ 避光 |
试剂（D）Mayer苏木素染色液 | 50ml | 100ml | 4℃ 避光 |
试剂（E）酸性分化液 | 50ml | 100ml | RT |
产品说明：
糖原染色是病理学中常规的染色方法之一，McManus在1946年最先使用PAS技术显示黏蛋白，该法常用来显示糖原和其他多糖，该染色液不仅能够显示糖原，还能显示中性黏液性物质和某些酸性物质，以及软骨、垂体、霉菌、真菌、色素、淀粉样物质、基底膜等。
氧化剂能氧化糖类及有关物质中的1，2-乙二醇基，使之变为二醛，醛与Schiff试剂能结合成一种品红化合物，产生紫红色。由于氧化剂还可氧化细胞内其他物质，使用时应注意选择好氧化剂浓度和氧化时间，使氧化控制在即能把乙二醇基氧化成醛基，又不至于过氧化，这是很关键的步骤。
PAS技术是唯一可检测不同种类的黏液物质（如糖原、黏蛋白和糖蛋白）的方法，但PAS技术却不能区别黏蛋白和糖原。若要准确鉴别黏液物质（如黏蛋白和糖原），需加入糖原消化步骤。大多数情况下可用α-淀粉酶或麦芽淀粉酶来催化糖原的糖苷键水解。形成水溶性的双糖-麦芽糖，在应用PAS技术之前将糖原从组织切片上除去。人类的唾液被认为是消化糖原的一种有效手段，但是出于安全以及缺乏标准唾液的考虑，不主张应用唾液。
糖原D-PAS染色液的特点在于糖原PAS染色之前经淀粉酶处理，糖原消化时需要两张相同的切片，脱蜡后一张切片用含有淀粉酶的适当缓冲液处理，另一张仅用缓冲液处理。然后两张切片均用PAS法染色，消化后染色消失表明存在糖原。
操作步骤（仅供参考）：
1、两张相同切片，二甲苯脱蜡，梯度乙醇入水。
2、一张切片入淀粉酶溶液处理20min。另一张不用淀粉酶溶液处理，入水1h作为对照。
3、流水冲洗两张切片各5～10min。
4、入氧化剂中，室温放置5～8min，一般不宜超过10min。
5、自来水冲洗1次，再用蒸馏水浸洗2次。
6、入 Schiff Reagent，置于室温阴暗处，浸染10～20min。
7、自来水冲洗10min。
8、入Mayer苏木素染色液中，染细胞核1～2min。
9、(可选)酸性分化液分化2～5s。
10、自来水冲洗10～15min后，更换双蒸水清洗，使其返蓝。
11、 二甲苯透明，中性树胶封固。
染色结果：
糖原、中性、唾液黏蛋白 | 红紫色 |
各种糖蛋白 | 红紫色 |
细胞核 | 蓝色 |
未处理的切片，糖原呈亮红色或红紫色；淀粉酶处理的切片，糖原阴性。 | |
注意事项：
1、切片脱蜡应尽量干净，否则影响染色效果。
2、需使用一张阳性对照片验证酶的活性。
3、氧化剂氧化时间不宜过久，氧化时的温度以18～22℃最佳。
4、试剂A、试剂B、试剂C应置于4℃密闭保存，使用时避免接触过多的阳光和空气。使用前，最好提前取出恢复到室温，避光暗处使用。
5、酸性分化液应经常更换新液，其分化时间应该依据切片厚薄、组织的类别和酸性分化液的新旧而定，另外分化后自来水冲洗时间应该足够。
6、在氧化剂和Schiff Reagent中作用时间非常重要，该依据切片厚薄、组织的类别等决定。
7、冷冻切片染色时间尽量要短。
8、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。