产品详情
糖原PAS染色试剂盒
货号:R05100
规格:4×50mL/4×100mL
有效期:6个月有效。
产品内容:
编号 名称 | 4×50mL | 4×100mL | Storage |
试剂(A)氧化剂 | 50mL | 100mL | 4℃ 避光 |
试剂(B)Schiff Reagent | 50mL | 100mL | 4℃ 避光 |
试剂(C)苏木素染色液 | 50mL | 100mL | RT 避光 |
试剂(D)酸性分化液 | 50mL | 100mL | RT |
产品说明:
糖原染色是病理学中常规的染色方法之一,McManus在1946年最先使用高碘酸-雪夫技术显示黏蛋白,该法常用来显示糖原和其他多糖,该染色液不仅能够显示糖原,还能显示中性黏液性物质和某些酸性物质,以及软骨、垂体、霉菌、真菌、色素、淀粉样物质、基底膜等。
氧化剂溶液能氧化糖类及有关物质中的1,2-乙二醇基,使之变为二醛,醛与Schiff试剂能结合成一种品红化合物,产生紫红色。由于氧化剂还可氧化细胞内其他物质,使用时应注意选择好氧化剂浓度和氧化时间,使氧化控制在即能把乙二醇基氧化成醛基,又不至于过氧化,这是很关键的步骤。
本糖原PAS染色液的特点:采用本公司特有配方技术,大大增强了染色效果;性能稳定,特异性强;操作简捷,仅需1h左右。
自备材料:
- 10%福尔马林固定液
2、蒸馏水
3、乙醇
操作步骤(仅供参考):
- 常规固定,常采用10%的福尔马林,常规脱水包埋。
- 石蜡切片脱蜡入蒸馏水;冰冻切片直接入蒸馏水。
- 自来水冲洗2~3min,再用蒸馏水浸洗2次。
- 置于氧化剂中,室温放置5~8min,一般不宜超过10min。
- 自来水冲洗1次,再用蒸馏水浸洗2次。
- 样本放入 Schiff Reagent,置于室温阴暗处,浸染10~20min。
- 自来水冲洗10min。
- 样本置于苏木素染色液中,染细胞核1~2min。
- 酸性分化液分化2~5s。
- 自来水冲洗10~15min后,更换双蒸水清洗,使其返蓝。
- 逐级常规乙醇脱水。 二甲苯透明,中性树胶封固。
染色结果:
PAS反应阳性物质 | 红色或紫红色 |
细胞核 | 蓝色 |
细胞质 | 深浅不一的红色 |
备注:颜色深浅很大程度上取决于样品在氧化剂溶液和 Schiff Reagent中作用时间的长短。
阴性对照(可选):
- 取淀粉酶1g溶解于PBS(pH5.3) 100mL,处理30~60min,与其他切片共同入氧化剂溶液。结果应为阴性。
- (备选方案)取唾液片(过滤后用)处理30~60min,与其他切片共同入氧化剂溶液。 结果应为阴性。
- (备选方案)如果对照片采用其自身样本,对照片不经氧化剂溶液这一步,直接入Schiff Reagent。 结果应为阴性。
注意事项:
- 切片脱蜡应尽量干净,否则影响染色效果。
- 氧化剂氧化时间不宜过久,氧化时的温度以18~22℃最佳。
- 氧化剂溶液和Schiff Reagent应置于4℃密闭保存,使用时避免接触过多的阳光和空气。使用前,最好提前30min取出恢复到在室温后,避光暗处使用。
- 酸性分化液应经常更换新液,其分化时间应该依据切片厚薄、组织的类别和酸性乙醇分化液的新旧而定,另外分化后自来水冲洗时间应该足够。
- 在氧化剂溶液和Schiff Reagent中作用时间非常重要,该依据切片厚薄、组织的类别等决定。
- 本染色液常用于常规组织切片染色,对于真菌、细胞、极其薄的切片,建议采购糖原PAS染色试剂盒(细胞真菌专用), 因为其氧化剂溶液和苏木素溶液浓度更低,不宜过染。
- 冷冻切片染色时间尽量要短。
- 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。