产品详情
糖原PAS染色液(真菌专用)
货号:R05150
规格:3×20ml /3×50ml
有效期:6个月有效。
产品内容:
3×20ml | 3×50ml | 保存 | |
试剂(A): 氧化剂 | 20ml | 50ml | 4℃ 避光 |
试剂(B): Schiff Reagent | 20ml | 50ml | 4℃ 避光 |
试剂(C): 亚硫酸钠溶液 | 20ml | 50ml | RT 密闭 |
产品简介:
糖原染色是病理学中常规的染色方法之一,McManus在1946年最先使用高碘酸-雪夫技术显示黏蛋白,该法常用来显示糖原和其他多糖,该技术不仅能显示糖原,还能显示中性黏液性物质和某些酸性物质以及软骨、垂体、霉菌、真菌、色素、淀粉样物质、基底膜等。氧化剂能氧化糖类及有关物质中的1,2-乙二醇基,使之变为二醛,醛与Schiff试剂能结合成一种品红化合物,产生紫红色。由于氧化剂还可氧化细胞内其他物质,使用时应注意选择好氧化剂的浓度和氧化时间,使氧化控制在既能把乙二醇基氧化成醛基又不至于过氧化,这是很关键的步骤。
糖原PAS染色液(真菌专用)利用真菌含有多糖,氧化剂氧化真菌壁上的多糖而暴露出醛基,醛基与无色Schiff结合呈现红色。该染色法性能稳定,特异性强;操作简捷,仅需0.5h; 浓度低氧化剂更适用于对真菌染色,无盐酸乙醇分化液分化步骤。
操作步骤(仅供参考):
- 常规固定(常采用10%福尔马林), 常规脱水包埋。
- 细胞涂片入蒸馏水(无需包埋、脱蜡)或组织切片脱蜡入蒸馏水。
- 入氧化剂,室温氧化10min。
- 自来水冲洗2次,蒸馏水浸洗2次。
- 入Schiff Reagent并加盖,置于室温阴暗处浸染10~20min。
- 用亚硫酸钠溶液滴洗2次,每次2min。
- 流水冲洗2min。
- 逐级常规乙醇脱水。二甲苯透明,中性树胶封固。
染色结果:
真菌:紫红色;
细胞质:深浅不一的红色
备注:颜色深浅很大程度上取决于样品在氧化剂和Schiff Reagent中作用时间的长短。
阴性对照(可选):
- 取淀粉酶1g溶解于PBS(pH5.3) 100ml,处理30~60min,与其他样本共同入氧化剂。结果应为阴性。
- (备选方案)取唾液片(过滤后用)处理30~60min,与其他样本共同入氧化剂。结果应为阴性。
- (备选方案)如果对照片采用其自身样本,对照片不经氧化剂这一步,直接入Schiff Reagent。结果应为阴性。
注意事项:
- 氧化剂氧化时间不宜过久,氧化时的温度以18~22℃最佳。
- 氧化剂、Schiff Reagent使用时避免接触过多的阳光和空气,使用前最好提前30min取出恢复至室温,避光暗处使用。
- 氧化剂和Schiff Reagent中作用时间非常重要,该依据切片厚薄、细胞或组织的类别等决定。
- 如常规切片建议用糖原PAS染色液,因为其氧化剂浓度相对较高。
- 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。