Schiff试剂
货号:R05310
规格:50mL/100mL/500mL
保存:4℃避光,6个月有效。
产品简介:
Schiff试剂又称为雪夫试剂或希夫试剂等,是Schiff于1866 年发现的一种有效的醛试剂,用于检测醛基(—CHO)。制备Schiff 试剂所用原料为碱性品红,其主要成分是副品红碱,为三氨基三苯甲烷的氯化物,其中的醌基正是品红显色的原因。在酸化的品红液中加入亚硫酸或者亚硫酸盐,品红被还原为品红-亚硫酸(或称白亚磺酸),即Schiff试剂。
Schiff试剂主要用于糖原、黏液物质等染色,常与过碘酸(也称高碘酸)配合使用,过碘酸是一种强氧化剂,它能氧化糖类及有关物质中的1,2-乙二醇基,使之变为二醛,醛与Schiff试剂能结合成一种品红化合物,产生紫红色。配制好的Schiff试剂接近于无色。
自备材料:
10%的福尔马林、蒸馏水或去离子水、过碘酸溶液、苏木素染色液、酸性乙醇分化液、95%乙醇、无水乙醇、封片剂
操作步骤(仅供参考):
1、常规固定,常采用10% 的福尔马林,常规脱水包埋。
2、石蜡切片脱蜡入蒸馏水;冰冻切片直接入蒸馏水。
3、自来水冲洗2~3m in,再用蒸馏水浸洗2 次。
4、置于过碘酸溶液中,室温放置5~8min,一般不宜超过10min。
5、自来水冲洗1 次,再用蒸馏水浸洗2 次。
6、样本放入Schiff Reagent,置于室温阴暗处,浸染10~20 min。
7、自来水冲洗10min。
8、样本置于苏木素染色液中,染细胞核1~2min。
9、酸性乙醇分化液分化。
10、自来水冲洗10~15min 后,更换双蒸水清洗,使其返蓝。
11、逐级常规乙醇脱水。
12、二甲苯透明。
13、中性树胶封固。
染色结果:PAS反应阳性物质(糖原或多糖)呈红色或紫红色
阴性对照(可选):
- 对照切片可以用唾液,取唾液片(过滤后用)处理30~60 min 后,与其他切片共同入过碘酸溶液。
- 对照片可以淀粉酶,取淀粉酶1g 于双蒸水或PBS(pH 5.3) 100ml,处理30~60min后,与其他切片共同入过碘酸溶液。
- 如果对照片采用其自身样本,对照片不经过碘酸溶液这一步,直接入Schiff Reagent。
染色结果:对照片呈阴性反应,无紫红色颗粒。
注意事项:
- Schiff Reagent 应置于4℃密闭保存,使用时避免接触过多的阳光和空气。
- Schiff Reagent 在室温过低(小于15℃)情况下反应缓慢,可以置于适宜温水(小于30℃)中恢复后再使用。
- 理想的Schiff Reagent接近于无色,如果试剂颜色呈极轻微粉红色亦可考虑使用。如试剂颜色呈明显的红色,应弃用。
- 颜色深浅很大程度上取决于样品在过碘酸溶液和Schiff Reagent中作用时间的长短。
- 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。