植物组织活性氧检测试剂盒 (DAB法)说明书
货号: R06080
规格：3×100mL
保存：2-8℃,避光保存，有效期1年。
产品组成：
试剂名称 | 3×100mL | 保存 | |
试剂(A):DAB染 色工作液 | 试剂A1:DAB染色液 | 10mL | 2-8℃,避光 |
试剂A2:DAB稀释液 | 90mL | 2-8℃ | |
临用前，按照1:9比例混合A1和A2配制DAB染色工作液，现配现用， 不宜提前配制。 | |||
试剂(B):组织脱色液 | 100mL | 室温 | |
试剂(C):组织保存液 | 100mL | 室温 | |
产品说明（仅供参考）:
该试剂仅用于科研领域，不适用于临床诊断或其他用途。
植物组织在胁迫环境条件下会产生多种活性氧 (ROS)，ROS 活性非常大且极其不稳定，因此 ROS
的检测通常因其最终产物而定。过氧化物是植物活性氧主要组成之一，在过氧化物酶的催化下，过氧化物能与 DAB (3.3-二氨基联苯胺四盐酸盐) 迅速反应生成棕红色沉淀，从而定位组织中的过氧化物。植物组织活性氧检测试剂盒(DAB 法) 用于植物活性组织中的过氧化物染色。一般应用于较嫩的根尖、叶片等的整体染色，染色后组织中有过氧化物聚集的部位呈棕色至深棕色。
操作步骤:(仅供参考)
1、组织准备:采集经胁迫(例如重金属) 的植物幼苗或叶片，自来水稍洗净，置于滤纸上吸于多余水分
2、组织染色:按比例配制 DAB 染色工作液，将实验样本浸入 DAB 染色工作液中，-0.1MPa 负压处理30min，然后室温避光浸染 4-12h，至阳性部位出现深棕色，其余部位为淡黄色或近无色或呈植物本身的颜色即可。 (可根据植物幼嫩程度和显色程度调整负压和染色时间)
3、组织脱色:用镊子将实验样本小心取出，浸入蒸馏水中来回漂洗 3-5 次，置于滤纸上吸干多余水分后，浸入组织脱色液中于水浴锅 70-80°C处理 20-40min 直至完全脱去组织背景颜色，处理期间如脱色液颜色较深可更换新鲜的组织脱色液。
4、结果观察:放凉后取出实验样本，浸入蒸馏水中来回漂洗 3-5 次，置于滤纸上吸干多余水分后，将样本转入适量组织保存液中浸泡 10-30 min，随后可取出拍照。样本可置于保存液中可常温保存月余。
染色结果：
ROS阳性部位 | 棕色至红棕色 |
组织背景(脱色后) | 无色或淡黄色 |
注意事项：
1. 过氧化物容易分解，因此植物样本需要新鲜采集，并尽快完成染色。
2. 任何外在刺激因素都可能刺激植物应激产生过氧化物，应尽量完整取材避免人为损伤造成假阳性。
3. 在组织样本染色完成后需尽快拍照保存结果。
4. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。