中性粒细胞碱性磷酸酶染色液 (NAP )

中性粒细胞碱性磷酸酶染色液说明书

货号：R06240

规格：4×2mL/4×10mL

保存：-20°C, 避光保存, 有效期6个月。

产品组成:

产品介绍：

碱性磷酸酶（Alkaline phosphatase,简称ALP或AKP）为一类磷酸酯酶，广泛分布于哺乳动物组织内, 其活性所需最适pH9.2-9.8。此酶主要存在于物质交换活跃之处（细胞膜），如肠上皮和肾近曲小管的刷状缘、附睾上皮之静纤毛、肝的毛细胆管膜以及微动脉和毛细血管动脉部之内皮，还见于内质网、高尔基复合体、吞饮小泡、肠上皮之溶酶体、中性粒细胞之中性颗粒以及平滑肌之细胞膜。

中性粒细胞碱性磷酸酶染色液（NAP）不是采用金属沉淀法来显示碱性磷酸酶活性，而是采用偶氮偶联法（又称同时偶联法），其原理是在pH 9.2-9.8的碱性条件下，细胞内碱性磷酸酶可使AB-BI磷酸盐水解，释放出磷酸和萘酚，后者与偶联重氮盐生成有色产物，定位于细胞质中。该染液专门用于血液或骨髓 细胞涂片中中性粒细胞碱性磷酸酶染色，结果较金属盐沉淀法可靠。

自备材料：

载玻片、显微镜

操作步骤：（仅供参考）

1. 制备新鲜血液或骨髓细胞涂片，NAP固定液固定30s,充分水洗。
2. 滴加配制好的NAP孵育液，避光孵育15-20min,水洗。
3. 核固红染色液复染5-8min或甲基绿染色液复染3-5min。

临床意义：

1. 类白血病反应积分明显增高，未经治疗的慢性粒细胞白血病积分明显减低。
2. 急性细菌性感染积分明显增高，病毒性感染积分多正常或减低。
3. 再生障碍性贫血积分常增高，PNH、MDS积分常减低。

注意事项：

1. 血液或骨髓细胞涂片应新鲜，薄厚适宜，及时固定，否则会影响酶的活性。
2. 培养细胞染色操作过程中，清洗、染色等步骤都应轻微，以免损伤或丢失细胞。
3. NAP孵育液易失效或降低阳性强度，即配即用，不宜久置。
4. 复染时，核固红染色液或甲基绿染色液二者取其一。
5. 每次染色时，应有阳性对照片。
6. 为了您的安全和健康，请穿戴实验服并戴一次性手套操作