EDTA脱钙液 (PH7.2 )

EDTA脱钙液（pH 7.2）

货号：R06290

规格：100mL/500mL

保存：常温保存，有效期1年。

产品简介：

一些组织内含有骨质或钙化灶时，含钙的组织不宜直接用石蜡包埋切片。这是因为钙和石蜡之间的密度不同，较难切出完整的切片。对含钙组织最好固定之后，再进行脱钙或二者同时进行。然后进行下游的实验，如脱水、透明、浸蜡、包埋、切片。用于脱钙的试剂很多，脱钙剂包括有机酸、无机酸、乙二胺四乙酸（EDTA）以及电解法脱钙。

EDTA 是一种相对较好的螯合脱钙剂，对组织结构影响最小，可以较好的保存组织的某些酶类， 经EDTA脱钙后的组织可以进行免疫组化和原位杂交染色。但是该法脱钙速度太慢，一般脱需要数周至数月。

EDTA 脱钙液优点：①经EDTA 脱钙的组织染色结果好；②对组织的结构损害小；③用化学方法测试可以确定脱钙的终点。

EDTA 脱钙液缺点：①脱钙速度很慢，不适合常规标本脱钙使用；②脱钙后组织会稍微变硬。

操作步骤（仅供参考）：

1. 骨组织脱钙时，取材不易过厚，一般大约5mm。
2. 组织固定后，用PBS 清洗3 次，每次20min。
3. 组织用蒸馏水洗清洗3 次，每次20min。
4. 组织转移至20～30 倍体积的EDTA 脱钙液中，脱钙10～30 天或更长时间。如果想加快脱钙速度，可以置于37℃进行脱钙。如果必要，更换新的EDTA 脱钙液继续脱钙，多数组织脱钙2 周～3 个月即可，每周更换一次，直至终点。亦可采用微波快速脱钙法：微波炉设在200W左右的档位，每次加热5min，依据组织厚度和密度重复3～5min，中间间隔3～5min。
5. 用蒸馏水冲洗数次。
6. 常规脱水、包埋。

注意事项：

• 1. 厚度5mm 的骨组织块脱钙时间一般脱钙10~30 天即可。
  2. 适当加温能加快脱钙的速度，一般不应超过37～40℃，温度过高容易使骨组织造成松散解体，尤其不可大于60℃。
  3. 脱钙应彻底，防止脱钙不足或过度。脱钙程度应控制在不影响组织切片的同时尽量缩短脱钙时间，以免脱钙过长引起组织损害。
  4. 脱钙用具避免使用金属容器，尽量使用玻璃容器。
  5. 骨组织脱钙应先固定后脱钙或脱钙固定同时进行，不应先脱钙后固定，以便减少组织的损伤程度。
  6. 每隔一段时间检测一次脱钙程度，避免脱钙过度，脱钙过度会增加组织的损伤程度，影响染色结果。
  7. 脱钙终点的测定（物理法）：采用针刺、手掐、钳夹等方法，当骨组织变软或针刺时没有阻力感即可终止脱钙。物理检测法会对组织结构有一定的损害，尽量避免用力过大或反复检测。
  8. 我司生产的生化试剂如无特殊标注，基本为非无菌包装，若用于细胞实验，请提前做好预处理。需低温保存的产品，一旦配成溶液，请分装保存，避免反复冻融造成的产品失效。产品信息仅供参考。本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗，食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。为了您的安全和健康，请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。