电解脱钙液(甲酸法)
货号: R06340
规格: 500mL
保存: 室温,避光保存,有效期1年。
产品介绍:
在组织切片过程中, 一些组织内含有骨质或钙化灶时,含钙的组织不宜直接用石蜡包埋切片。这是因 为钙和石蜡之间的密度不同,较难切出完整的切片。对含钙组织最好固定之后,再进行脱钙或二者同时进 行。然后进行下游操作如脱水、透明、浸蜡、包埋、切片。用于脱钙的试剂很多,脱钙剂包括有机酸、无 机酸、乙二胺四乙酸(EDTA)以及电解法脱钙。在有机酸中,甲酸、乙酸比较适合于骨髓组织脱钙。
电解脱钙液的优点:①脱钙速度快;②适用于大多数组织的脱钙。其缺点:①对组织有一定的损害;
②脱钙后需要硫酸钠溶液进行碱处理。
操作步骤:(仅供参考)
1、 骨组织脱钙时,取材不易过厚, 一般大约5mm。
2、 组织固定后,用PBS清洗3次。
3、 组织用蒸馏水洗清洗3次。
4、 安装电解装置:取铂金丝一根,将标本用铂金丝一端缠绕数圈,置于容器底部一侧,铂金丝另一端连 接电源正极。在容器的另一侧将一只钢片或炭精棒的下端插入容器内,上段与电源负极相连。
5、 加入电解脱钙液,置于恒温水浴箱中。 一般采用直流电源6V,如有整流器可调至8~10V。
6、 用流水冲洗数小时。
7、 入5%硫酸钠溶液进行碱处理。
8、 常规脱水、包埋。
注意事项:
1、 厚度5mm的骨组织块脱钙时间一般脱钙10min~3h即可。
2、 脱钙应彻底,防止脱钙不足或过度。脱钙程度应控制在不影响组织切片的同时尽量缩短脱钙时间,以 免脱钙过长引起组织损害。
3、 骨组织脱钙应先固定后脱钙或脱钙固定同时进行,不应先脱钙后固定,以便减少组织的损伤程度。
4、 每隔一段时间检测一次脱钙程度,脱钙过度会增加组织的损伤程度,影响染色结果。
5、 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
附录:
脱钙终点的测定(物理法):采用针刺、手掐、钳夹等方法,当骨组织变软或针刺时没有阻力感即可终 止脱钙。物理检测法会对组织结构有一定的损害,尽量避免用力过大或反复检测。