甲酸脱钙液
货号:R06370
规格: 500mL
保存: 室温,避光保存,有效期1年。
产品介绍:
在组织切片过程中, 一些组织内含有骨质或钙化灶时,含钙的组织不宜直接用石蜡包埋切片。这是因 为钙和石蜡之间的密度不同,较难切出完整的切片。对含钙组织最好固定之后,再进行脱钙或二者同时进行。然后进行下游操作如脱水、透明、浸蜡、包埋、切片。用于脱钙的试剂很多,脱钙剂包括有机酸、无机酸、乙二胺四乙酸(EDTA)以及电解法脱钙。在有机酸中,甲酸、乙酸比较适合于骨髓组织脱钙。甲酸脱 钙液是一种使用范围广泛的脱钙剂,但是该法脱钙速度太慢,不适合密皮骨质的脱钙。
甲酸脱钙液主要由甲酸、福尔马林等组成。其优点:①对细胞核染色结果较好;②兼具脱钙和组织固 定的作用;③适用于小块组织和牙齿的脱钙。其缺点:①脱钙速度比较慢,不适合常规标本脱钙使用;② 不适合密皮骨质脱钙使用;③脱钙后需要硫酸钠溶液进行碱处理。
自备材料:
PBS、蒸馏水、5% 硫酸钠溶液
操作步骤:(仅供参考)
1、 骨组织脱钙时,取材不易过厚, 一般大约5mm。
2、 组织固定后,用PBS清洗3次,每次20min。
3、 组织用蒸馏水清洗3次,每次20min。
4、 组织转移至20~30 倍体积的甲酸脱钙液中,脱钙3~10天或更长时间。如有必要,更换新的甲酸脱钙液 继续脱钙直至终点,多数组织脱钙1周即可。
5、 用蒸馏水冲洗数次。
6、 组织立即入5% 硫酸钠溶液进行碱处理。
7、 充分流水冲洗18h以上。
8、 常规脱水、包埋。
注意事项:
1、 厚度5mm的骨组织块脱钙时间一般脱钙3~10天即可。
2、 脱钙应彻底,防止脱钙不足或过度。脱钙程度应控制在不影响组织切片的同时尽量缩短脱钙时间,以 免脱钙过长引起组织损害。
3、 骨组织脱钙应先固定后脱钙或脱钙固定同时进行,不应先脱钙后固定,以便减少组织的损伤程度。
4、 每隔一段时间检测一次脱钙程度,脱钙过度会增加组织的损伤程度,影响染色结果。
5、 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
附录:
脱钙终点的测定(物理法):采用针刺、手掐、钳夹等方法,当骨组织变软或针刺时没有阻力感即可终 止脱钙。物理检测法会对组织结构有一定的损害, 尽量避免用力过大或反复检测。