产品详情
HNB指示剂(100×,LAMP级)说明书
货号: R10050
规格:1mL
保存:-20℃,1年
产品说明(仅供参考):
该试剂仅用于科研领域,不适用于临床诊断或其他用途。
LAMP 是一种新型核酸扩增技术,采用4或6条能够识别目的基因上的6 个特异区域的引物,依赖于Bst DNA 聚合酶的强链置换活性,在 30~60 分钟内 DNA 扩增可达 109~1010 倍。LAMP 测方法分为多种,包括染料法、浊度法、电泳法及的 TaqMan 荧光探针法。羟基萘酚蓝 (HNB)是一种金属离子指示剂,HNB 与镁离子(最适浓度一般为 8mM-10mM) 结合使得反应体系初始颜色为紫罗兰色,随着反应的进行,Mg2+与析出的焦磷酸根离子反应生成焦磷酸镁沉淀,羟基萘酚蓝失去了镁离子使得体系颜色变为天蓝色,而未反应的体系则仍保持着紫罗兰色。
操作步骤:(仅供参考)
- 将本产品放置在室温条件下待用。
- 将本染料按 LAMP 反应体系总体积的 1/100 加入到 LAMP 扩增反应液中。如体系较小,建议先用无菌水将 100X母液稀释成 10X 母液,用时按 10% 的比例向反应体系中加入 1x母液。 (见注意事项1、2)
- 配制好反应液后开始反应,观察反应液颜色变化。
染色结果:
发生扩增 | 反应液由淡紫色变成淡蓝色 |
未发生扩增 | 反应液为淡紫色 |
注意事项:
1、 指示剂加入比例可根据反应体系显色情况进行适当调整,本产品建议比例为1:100。
2、本产品的显色与反应体系中 Mg-的浓度和 NTP 的浓度密切相关,加入本产品之前,LAMP 反应体系中的 dNTP 的终浓度最好为 3.2mM,Mg的终浓度最好为 8mM,否则不会发生淡紫色到淡蓝色的颜色转变。
3、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。